福建省转基因水稻快速检测技术研究取得重要进展
来源:    发布时间: 2014-10-12 09:30   729 次浏览   大小:  16px  14px  12px
福建省转基因水稻快速检测技术研究取得重要进展
由福建省农业科学院生物技术研究所承担的省科技计划项目“转基因水稻的快速检测技术研究”通过了省科技厅组织的专家验收。
该项目选取了BT类抗虫基因cry1Ac、cry1Ca、cry30FAa1基因,以及豇豆胰蛋白酶抑制剂基因cpti与潮霉素磷酸转移酶标记基因 hpt,构建细菌表达载体并纯化了目的蛋白,制备了Cry1Ac、Cry1Ca、Hpt、CPTI蛋白的多克隆抗体,进行了Cry1Ab、Cry1Ac、 Hpt蛋白的单克隆抗体制备。
  建立了胶体金标记检测试纸条技术体系,针对试纸条制备中胶体金颗粒的大小,胶体金标记蛋白最适用量与pH值,不同膜材的选择,试纸条规格,包被液与胶 体金重悬液组分等进行了优化,探索了最佳制备工艺,制备了Cry1Ac、Cry1Ca与CPTI的转基因检测试纸条,并制订了试纸条中试生产技术资料与检 测说明书。
  通过该技术制备的胶体金试纸条检测转cry1Ac与cpti基因水稻植株,与ELISA结果比较发现,Cry1Ac试纸条灵敏度为96.0%,特异性 为100%,符合率为96.1%;CPTI试纸条灵敏度为91.8%,特异性为94.8%,符合率为93.0%。为转基因水稻选育过程中的检测奠定基础。
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